• 一文解析细胞破碎的三种方法
  • 更新日期:2021-12-13 浏览次数:4671
  细胞破碎,细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术。细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁。
 
  下面小编简单解析一下细胞破碎的三种方法,如下所示:
 
  (1)酸碱处理:调节pH值,改变蛋白质的荷电性质,提高产物的溶解度。
 
  (2)化学试剂处理:用表面活性剂或有机溶剂(甲苯)处理细胞,增大细胞壁的通透性,降低胞内产物的相互作用,使之容易释放。
 
  (3)酶菌溶:利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞,使细胞壁受到部分或*破坏后,再利用渗透压冲击等方法破坏细胞膜,进一步增大胞内产物的通透性。 酶溶的优点:操作温和,选择性强,酶能快速地破坏细胞壁,而不影响细胞内含物的质量,但缺点是酶的费用高,因而限制了它在大规模生产中的应用。
 
  (4)化学渗透法与机械破碎法相比:速度低,效率差,且化学或生化试剂的添加形成新的污染,给进一步的分离纯化增添麻烦。但化学渗透法选择性高,胞内产物的总释放率低,可有效抑制核酸的释放,料液粘度小,有利于后处理。